Pyrosekvenovanie a epigenetika

Pyrosekvenovanie je metóda, ktorá spája sekvenovanie využívajúce syntézu komplementárneho vlákna pomocou DNA polymerázy spolu s analýzou jej aktivity pomocou ďalších enzýmov a chemikálií. Pyrosekvenácia je založená na súčinnosti 4 enzýmov: DNA polymerázy, ATP sulfurylázy, luiciferázy a apyrázy spolu s enzymatickými substrátmi: adenozín fosfosulfát, d-luciferín a sekvenovaný templát s primermi. Táto metóda oproti klasickej Sangerovej metóde využíva reverzibilnú termináciu polymerizácie. Aktivita DNA polymerázy môže byť monitorovaná pomocou bioluminiscencie.

Pyrosekvenáciou je možné sekvenovať najmenej 20 nukleotidové úseky. Metóda umožňuje identifikovať nové mutácie, polymorfizmy, epigenetické zmeny alebo variácie transkriptómu. Touto metódou je možné genotypizovať a odlíšiť patogénne vs. nepatogénne bakteriálne kmene, podobne genotypizovať vírusy (i ľudské) a identifikovať ich rezistenciu voči používaným terapeutikám.  

Pre bližšie informácie o poskytovaní služby pyrosekvenovania nás kontaktujte na geneprot@geneprot.sk